細(xì)胞轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)可以說是生物實(shí)驗(yàn)中的一道難關(guān)，做得好的話，可以大大降低實(shí)驗(yàn)難度;如果轉(zhuǎn)染率低，那么，再昂貴的細(xì)胞也只能報(bào)廢。有鑒于此，普健生物今天在這里和大家具體聊聊有關(guān)細(xì)胞轉(zhuǎn)染的那些事。

　　一般來說，我們可以通過三個(gè)途徑來進(jìn)行細(xì)胞轉(zhuǎn)染：物理介導(dǎo)、化學(xué)介導(dǎo)和生物介導(dǎo)。

　　物理介導(dǎo)：直接通過電穿孔、顯微注射、基因槍等工具，將基因注入到細(xì)胞內(nèi)部的方式;

　　化學(xué)介導(dǎo)：相對來說，化學(xué)介導(dǎo)的方法要多一些，比如通過磷酸鈣共沉淀法、脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法等;

　　生物介導(dǎo)：一般采用病毒介導(dǎo)轉(zhuǎn)染技術(shù)來實(shí)現(xiàn);

　　對于細(xì)胞轉(zhuǎn)染來說，需要轉(zhuǎn)染效率高一級細(xì)胞毒性小等特點(diǎn)。所以，隨著技術(shù)的發(fā)展，病毒介導(dǎo)的方式使用的越來越多，因?yàn)樗芡瑫r(shí)滿足如上的兩種需求。只不過，這種方法需要的技術(shù)水平較高，一般實(shí)驗(yàn)室較難達(dá)到要求。

　　常用的轉(zhuǎn)染技術(shù)有哪些?

　　就現(xiàn)在而言，常用的轉(zhuǎn)染技術(shù)主要有兩種：瞬時(shí)轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染。

　　瞬時(shí)轉(zhuǎn)染(transient transfection)：不會將外源的DNA/RNA整合到宿主染色體上，而且一個(gè)宿主細(xì)胞可以存在多個(gè)拷貝數(shù)，一般來說生產(chǎn)水平非常的高，但是持續(xù)時(shí)間要短很多(通常只能持續(xù)2-3天);

　　穩(wěn)定轉(zhuǎn)染(Stable transfected)：會將外源DNA/RNA整合到宿主染色體上(也可能作為游離體)。外源DNA在染色體中的表達(dá)量低;

　　對于瞬時(shí)轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染來說，不存在那個(gè)方法更好的說法，只是說，在不同實(shí)驗(yàn)需求中，哪個(gè)方法更加合適。對于那些理想的既能保證高轉(zhuǎn)染率，又能低細(xì)胞毒素的情況，幾乎不能能完全實(shí)現(xiàn)。只有最合適的方法，沒有最完美的方法。更多細(xì)胞轉(zhuǎn)染知識，敬請關(guān)注武漢普健生物。