細胞轉(zhuǎn)染技術在蛋白抗體制備的一種常用方法，而且隨著技術的不斷發(fā)展，細胞轉(zhuǎn)染已經(jīng)成為研究和控制真核細胞基因功能的常用工具。而且在基因功能、基因調(diào)控等方面有著廣泛的使用。那么，具體什么是細胞轉(zhuǎn)染技術?它的原理和特點都有哪些呢?今天普健生物就和大家具體聊聊。

　　什么是細胞轉(zhuǎn)染技術?

　　所謂的細胞轉(zhuǎn)染，其實就是將外源分子導入到真核細胞內(nèi)，通過這些外源細胞來該表真核細胞內(nèi)蛋白表達能力的一種技術。

　　使用細胞轉(zhuǎn)染技術的目的是什么?

　　細胞轉(zhuǎn)染的主要目的就是研究基因的功能和基因的產(chǎn)物，對細胞中的一些表達進行抑制或增強，控制細胞內(nèi)蛋白產(chǎn)生。

　　轉(zhuǎn)染為什么分為瞬時轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染?

　　所謂的瞬時轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的主要區(qū)別其實就是其是否需要將外源核酸整合到宿主染色體上;

　　瞬時轉(zhuǎn)染：不用將外源基因整合到宿主染色體中，通常這個情況只維持幾天，多用于啟動子和其他調(diào)控元件的分析;

　　穩(wěn)定轉(zhuǎn)染：將外源基因整合到宿主染色體中，也可以作為一種游離體存在，通過一些選擇標記，從而得到穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的同源細胞系;

　　那么，有哪些轉(zhuǎn)染方法及其應用呢?

　　1、磷酸鈣法。通過磷酸鈣DNA復合物吸附細胞膜，通過細胞內(nèi)吞，實現(xiàn)轉(zhuǎn)染。但是不適合用于原代細胞，雖然操作簡便，但是重復性差;

　　2、電穿孔法。通過高脈沖電壓破壞細胞膜電位，使得DNA通過膜小孔進入。但是容易造成細胞死亡，DNA和細胞用量大，而且需要根據(jù)不同細胞的類型進行電穿孔實驗;

　　3、陽離子脂質(zhì)體法。通過將帶正點的脂質(zhì)體與核酸帶浮點的磷酸基團形成的復合物形成細胞內(nèi)吞。這個方法適用性較廣，重復性好，但是轉(zhuǎn)染的時候需要去除血清，且轉(zhuǎn)染后細胞類型變化較大;

　　4、病毒介導法。通過侵染宿主的病毒將外源基因整合到染色體中。對于那些難轉(zhuǎn)染的細胞來說，這個方法非常合適，但是所攜帶的基因不宜太大，且細胞需處于分裂期;

　　5、基因槍法。通過重金屬吸附DNA，將其用彈道射入細胞，使得其隨著DNA在細胞內(nèi)釋放、表達。使用范圍相對來說較廣;