普健生物自主研發(fā)的Xten single B 兔單克隆技術(shù)是將單B細(xì)胞鑒定分離與多種PCR技術(shù)相結(jié)合，開(kāi)發(fā)出一個(gè)全新的快速單克隆抗體制備技術(shù);它以單個(gè)B細(xì)胞為起點(diǎn)，利用每個(gè)B細(xì)胞只產(chǎn)生一種特異性抗體的特點(diǎn)，直接從單個(gè)B細(xì)胞中擴(kuò)增出抗體基因、進(jìn)而獲得抗原特異性抗體。

該技術(shù)所制備的抗體具有高通量、高效率、高穩(wěn)定性等優(yōu)點(diǎn)，保留了豐富的基因多樣性和重輕鏈可變區(qū)的天然配對(duì)。

Single B兔單克隆抗體開(kāi)發(fā)技術(shù)，相較傳統(tǒng)鼠雜交瘤方案，兔單抗的親和力更強(qiáng)，具有靈敏度高、穩(wěn)定性好，易大規(guī)模表達(dá)生產(chǎn)的特點(diǎn)。

技術(shù)創(chuàng)新：獨(dú)家B細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)，免除知識(shí)產(chǎn)權(quán)費(fèi)。

專利佐劑：利用高效水性佐劑，45天完成全流程快速免疫。

超值套餐：3.99萬(wàn)起的基礎(chǔ)套餐，性價(jià)比領(lǐng)先行業(yè)。

1.動(dòng)物免疫及血清效價(jià)ELISA檢測(cè)

普健生物利用專業(yè)開(kāi)發(fā)的快速免疫水佐劑，使用免疫原免疫新西蘭大白兔，在第21天即可完成3次免疫并進(jìn)行血清檢測(cè)，第三次免疫后血清檢測(cè)效價(jià)大于128K。

第三次免疫后血清效價(jià)檢測(cè)結(jié)果(Day21)

2.血清競(jìng)爭(zhēng)ELISA檢測(cè)

使用競(jìng)爭(zhēng)ELISA對(duì)第三次免疫后陽(yáng)性血清進(jìn)行分析，酶標(biāo)板固相上包被OVA-SG，液相中同時(shí)加入未偶聯(lián)小分子及免疫血清進(jìn)行孵育，結(jié)果顯示血清具有明顯的競(jìng)爭(zhēng)趨勢(shì)。

第三次免疫后血清競(jìng)爭(zhēng)檢測(cè)結(jié)果(Day21)

3.重組兔單抗表達(dá)及鑒定

經(jīng)過(guò)流式篩選、培養(yǎng)和測(cè)序嚴(yán)格步驟，將測(cè)序得到的6個(gè)抗體利用普健生物自主開(kāi)發(fā)的XtenCHO系統(tǒng)進(jìn)行重組表達(dá)，純化后得到純度高、親和力好的重組兔單抗，6株重組兔單抗ELISA效價(jià)均大于1:1000000。

重組兔單抗SDS-PAGE

重組兔單抗ELISA效價(jià)檢測(cè)

4.重組兔單抗競(jìng)爭(zhēng)ELISA檢測(cè)

將6株重組兔單抗分別進(jìn)行競(jìng)爭(zhēng)ELISA，6株均有良好競(jìng)爭(zhēng)效果，其中最優(yōu)秀克隆1#抗體的IC50達(dá)到210.9 pg/mL，R²>0.99。