在我們進行真核細胞蛋白表達時，真核細胞培養(yǎng)是一個必不可少的過程，就和雜交瘤細胞蛋白表達中的雜交瘤細胞融合一樣，它從根本上制約著真核蛋白表達的成功與否。然而，和蛋白表達一樣，我們在進行真核細胞培養(yǎng)的過程中，也常常會遇到各種各樣的問題。有鑒于此，普健生物在這里和大家聊聊有關真核細胞培養(yǎng)中的幾個常見問題，以及遇到這些問題時的解決方案。

　　1、細胞不貼壁

　　在培養(yǎng)過程中，如果細胞不貼壁，一般來說造成這個現(xiàn)象的原因主要有三種：胰蛋白酶消化過度、支原體污染以及培養(yǎng)液中缺乏貼壁因子。這個時候，我們可以考慮通過降低胰蛋白酶濃度、分離培養(yǎng)物以及清潔支架的方式來解決問題。當然了，如果通過如上幾個方式依然沒有解決，那么，我們需要結合培養(yǎng)過程進行分析對比，找出其問題所在;

　　2、PH值變化快

　　培養(yǎng)液中PH值變化過快的原因相對較多，比如緩沖系統(tǒng)緩沖力不夠、培養(yǎng)液鹽濃度不正確、培養(yǎng)液污染、二氧化碳張力不夠等等，當出現(xiàn)這個問題時，我們可以適當減少培養(yǎng)液中二氧化碳的含量，或者改用不依賴二氧化碳的培養(yǎng)液，并保證培養(yǎng)液的純度，減少其污染來解決;

　　3、細胞生長緩慢

　　在預定時間內細胞培養(yǎng)量不足，細胞存在生長緩慢的情況。其原因主要是培養(yǎng)液選擇不對、相關試劑保存不當以及培養(yǎng)液被污染(少量細菌或真菌感染)。當細胞培養(yǎng)緩慢時，我們可以考慮更換培養(yǎng)液成分、增加原始細胞濃度、補加谷氨酰胺或生長因子以及加入抗生素等方式來進行解決;

　　4、細胞死亡

　　培養(yǎng)一段時間后發(fā)現(xiàn)細胞直接死亡，這個現(xiàn)象發(fā)生的主要原因是培養(yǎng)箱內缺二氧化碳、箱內溫度變化大、細胞損傷或死亡、培養(yǎng)過程中代謝物堆積等，這個時候，我們需要定時檢測箱內二氧化碳含量、控制好箱內溫度、實驗前檢測好細胞活性，并檢測培養(yǎng)液的滲透壓，這樣才能在更大程度上避免細胞的死亡;

　　當然了，細胞培養(yǎng)過程中需要面臨的問題還有很多，只有將這些方面都好了后，才能在更大程度上保證細胞的培養(yǎng)。對于真核細胞表達來說，只有活性好、質量高的細胞才能在更大程度上滿足我們后期有關蛋白制備的需求。武漢普健生物專業(yè)為廣大用戶提供真核蛋白表達服務，如果您有相關需求，歡迎來電咨詢。