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什么是抗體庫?噬菌體抗體庫如何構建?

發(fā)表時間:2023-04-28 訪問次數:430

  對單克隆抗體和多克隆抗體有一定的了解后,我們又發(fā)現了一個新的詞:抗體庫,也有稱之為抗體文庫的。因為在涉及噬菌體展示技術的時候,常常會提到一個詞:噬菌體展示文庫。以前一直不明天,為什么要這么表述。有鑒于此,今天普健生物就和大家一起學習學習。

  首先,什么是抗體庫?

  顧名思義,抗體庫指的就是機體在受到抗原刺激后,產生的一系列特異性抗體的總和。簡單來說,就是某種抗原刺激機體后,會產生各類抗體,這些抗體的混合物則被稱為抗體庫。

  噬菌體抗體庫的構建流程為何?

  1、提取RNA。通過離心、震蕩、靜置等一系列的手段,提取無RNA酶的RNA;

  2、反轉錄。將提取出來的RNA通過反轉錄的方式,獲得cDNA;

  3、抗體片段擴增。通過反轉錄cDNA中擴增特定的抗體片段,對其進行片段擴增;

  4、克隆到噬菌體上。將擴增所得的多樣DNA進行抗體基因序列和噬菌體載體的酶切,將所需片段克隆到噬菌體質粒上;

  5、轉化菌庫。通過對其連接產物進行電轉和培養(yǎng)后,獲得菌庫;

  6、擴增并純化。將上一步的菌體混合物進行培養(yǎng)后,通過相關操作對其進行擴增和純化,最終獲得數量足夠的抗體庫;

  當然了,如上我們也只是和大家簡單聊了一下大概的步驟,真是操作的復雜程度非一兩句可以描述得了的。如果您有興趣,可以在我們之前發(fā)布的文章“納米抗體之噬菌體文庫構建過程詳解”中進行詳細了解。當然了,如果您想要構建噬菌體抗體庫,您也可以直接聯系普健生物,我們擁有15年蛋白抗體制備經驗,為您提供最優(yōu)質的服務,歡迎您的來電咨詢。

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