隨著生物技術(shù)的發(fā)展，越來越多的方法開始在抗體藥物生產(chǎn)中投入使用?？贵w藥物開發(fā)是一個非常繁瑣的過程，而穩(wěn)定細(xì)胞株則幾乎適用于抗體藥物開發(fā)的各個階段。無論是重組蛋白、抗體生產(chǎn)，還是檢測分析和功能性研究，幾乎都適合使用。今天，普健生物就和大家具體聊聊有關(guān)穩(wěn)定細(xì)胞株構(gòu)建的原理及方法。

　　其實很多人禁不住地想問：什么是穩(wěn)定細(xì)胞株?它到底是個什么操作?

　　所謂的穩(wěn)定細(xì)胞株，其實就是能夠?qū)崿F(xiàn)穩(wěn)定表達的細(xì)胞株，基于某一細(xì)胞系構(gòu)建的持續(xù)性過表達或干擾特定基因的細(xì)胞系。我們知道一般的細(xì)胞是無法實現(xiàn)持續(xù)表達的，而穩(wěn)定細(xì)胞株則能夠通過一定的方法讓細(xì)胞實現(xiàn)穩(wěn)定持續(xù)性表達;

　　穩(wěn)定細(xì)胞株的構(gòu)建原理是什么?

　　通過基因技術(shù)將外源DNA或RNA克隆到具備某種抗性的載體上，重組的載體則會整合到染色體中，并隨著細(xì)胞的分裂穩(wěn)定傳導(dǎo)下去，而后再對細(xì)胞進行篩選，這樣就能獲得我們所需能夠?qū)崿F(xiàn)穩(wěn)定表達的細(xì)胞株;

　　為什么要用到穩(wěn)定細(xì)胞系?

　　1、使用穩(wěn)定細(xì)胞系能夠有效降低頻繁轉(zhuǎn)染的成本;

　　2、可以更好地實現(xiàn)基因干擾表達的結(jié)果;

　　3、避免因為人為原因所造成的結(jié)果不準(zhǔn)確的情況;

　　什么時候需要用到穩(wěn)定細(xì)胞系?

　　1、外源基因需要實現(xiàn)長期穩(wěn)定表達時;

　　2、需要使用到誘導(dǎo)表達系統(tǒng)時;

　　3、目的基因過表達或需要跟然時空特異性時;

　　4、細(xì)胞或病毒無法實現(xiàn)高傳導(dǎo)效率時;

　　5、需要向動物體內(nèi)注射外源表達片段細(xì)胞時;

　　6、細(xì)胞個體存在差異時;

　　7、需要將外源片段插入基因組中時;

　　而目前常用的穩(wěn)定細(xì)胞構(gòu)建方法主要有三種：單克隆環(huán)法、96孔單克隆稀釋法、逆轉(zhuǎn)錄病毒混合克隆制備法，這些方法我們將在后期和大家具體介紹，本次就不贅述了。

　　總的來說，穩(wěn)定細(xì)胞株的構(gòu)建能夠在極大程度上避免一些重組蛋白所產(chǎn)生的無法表達的情況，以及應(yīng)對一些細(xì)胞無法實現(xiàn)高表達的情況。當(dāng)然了，穩(wěn)定細(xì)胞株也非萬能的，在很多情況下反倒會造成相關(guān)資源的損耗，所以，需要結(jié)合實際情況來進行選擇。普健生物專業(yè)為您提供穩(wěn)定細(xì)胞株構(gòu)建服務(wù)，如果您有相關(guān)需求，歡迎來電咨詢。