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什么是雜交瘤測(cè)序?它的操作流程是怎樣的?

發(fā)表時(shí)間:2023-03-06 訪問次數(shù):4209

  說(shuō)到雜交瘤測(cè)序,大家或許并不怎么熟悉,但是說(shuō)到抗體測(cè)序的話,相信大家一定會(huì)非常的了解。在我們制備單克隆抗體時(shí),常常會(huì)使用到雜交瘤技術(shù),制備出的雜交瘤需要盡快凍存,但是,凍存過程中往往會(huì)出現(xiàn)失活的現(xiàn)象。所以,我們就需要對(duì)篩選出的雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行相關(guān)測(cè)序工作。

  經(jīng)過測(cè)序后的雜交瘤,能夠知道其完整的序列,后期在制備單克隆抗體的時(shí)候,可以通過相關(guān)序列通過重組抗體來(lái)制備所需抗體。不僅能解決雜交瘤失活的現(xiàn)象,也能保證抗體不同批次之間的一致性。當(dāng)然了,雜交瘤測(cè)序的意義不止于此。

  雜交瘤測(cè)序的流程是怎樣的呢?

  1、雜交瘤細(xì)胞RNA提取。從雜交瘤細(xì)胞中提取完整的RNA序列;

  2、RNA反轉(zhuǎn)錄。通過反轉(zhuǎn)錄,獲得完整的DNA序列;

  3、獲得抗體輕重鏈基因。通過一系列剪切提取的操作,獲得抗體重鏈/輕鏈的可變區(qū)基因;

  4、輕重鏈基因測(cè)序。通過抗體測(cè)序的手段,測(cè)定輕重鏈的基因序列;

  5、基因生物學(xué)分析。分析所得基因的生物學(xué)特性,剔除其中非功能性DNA,最終獲得我們所需抗體序列;

  6、得到抗體序列;

  相對(duì)于那些直接對(duì)抗體進(jìn)行蛋白分析從而得到基因序列的方式相比,雜交瘤測(cè)序所得的基因序列更加的準(zhǔn)確,而且能夠有效避免了因?yàn)榱涟彼岷彤惲涟彼犭y以區(qū)分的問題。所以,總的來(lái)說(shuō),雜交瘤測(cè)序的準(zhǔn)確性更高,使用起來(lái)也更加的方便,也為抗體人源化的實(shí)現(xiàn)奠定了更好的基礎(chǔ)。普健生物專業(yè)為廣大該用戶提供雜交瘤測(cè)序服務(wù),如果您有相關(guān)需求,歡迎來(lái)電咨詢。

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