作為生命的主要承擔(dān)者，蛋白一直是科研項目中備受關(guān)注的一員。在生命體中，蛋白一直都不是單一運作的，往往需要很多蛋白共同配合來完場一個動作。這個時候，人們就提出了一個新的理念：蛋白互作?，F(xiàn)階段的蛋白互作技術(shù)您了解多少?下面，普健生物和大家具體聊聊。

　　什么是蛋白互作?

　　蛋白互作(PPls)其實就是一相細胞的基礎(chǔ)事件，他發(fā)生在細胞結(jié)構(gòu)和細胞器的每一個生理過程中，蛋白之間的配合、作用，最終完成細胞所需的一次生理周期過程。

　　蛋白互作分析的意義?

　　蛋白互作分析能夠闡明蛋白質(zhì)的相互作用在何時、何地發(fā)生以及蛋白質(zhì)復(fù)合物如何形成為確定蛋白質(zhì)生物學(xué)功能提供了重要基礎(chǔ)?？梢哉f，通過這項技術(shù)，我們能夠更好地對細胞進行研究，以便于進一步了解生命。

　　那么，蛋白互作分析的方法有哪些呢?

　　就目前而言，常用的蛋白互作分析方法主要有四種，具體如下：

　　1、親和純化及免疫共沉淀

　　免疫共沉淀技術(shù)簡稱COIP技術(shù)，是通過抗原抗體之間的特異性結(jié)合原理完成，通過在細胞裂解液中添加特異性抗體，使得抗原和抗體形成沉淀，而后在通過復(fù)合物觀察并驗證抗原與其他蛋白之間相互作用的方法;

　　這個方法能真實檢測體內(nèi)的生理情況，實驗條件溫和，并且可以分離到天然狀態(tài)的蛋白化合物。但是對于那些結(jié)合力弱的蛋白來說，效果就顯得差強人意了;

　　2、Pull Down

　　Pull-Down技術(shù)，其實就是利用相對固化并且標記過后的標簽蛋白從細胞裂解液中釣出與之相對應(yīng)的蛋白的方法。而后通過對那些被“釣”出來蛋白進行研究，從而確定蛋白之間相互作用的關(guān)系。

　　3、雙分子熒光互補

　　雙分子熒光互補技術(shù)指的是通過將熒光蛋白的多肽鏈在不保守的氨基酸處切開，形成兩個多肽片段，而后將這兩個多肽片段分別鏈接到一對能發(fā)生互補作用的目標蛋白上。當這兩個蛋白相互作用時，會造成兩個分開的熒光蛋白互補，從而發(fā)出熒光;

　　4、酵母雙雜交實驗

　　酵母雙雜系統(tǒng)是當前使用最為廣泛的一種方法，它通過將靶蛋白和誘導(dǎo)蛋白特異性結(jié)合，誘餌蛋白結(jié)合于報道基因的啟動子,啟動報道基因在酵母細胞內(nèi)的表達,如果檢測到報道基因的表達產(chǎn)物,則說明兩者之間有相互作用,反之則兩者之間沒有相互作用;

　　這四種方法各具特色，適合于不同的使用環(huán)境，我們在進行相關(guān)實驗的時候，可以結(jié)合當前的情況選擇最適合的方法。武漢普健生物專業(yè)為廣大用戶提供蛋白抗體表達服務(wù)，如果您有相關(guān)需求，歡迎來電咨詢。